课程内容

《菊花的组织培养》
由于菊花的病毒种类比较多，而且危害较为严重。使用扦插繁殖苗，容易引起病毒病的扩张和蔓延。
一、植物组织培养的基本过程
细胞分化
细胞分化的本质是什么？
在一个发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态结构和生理功能上发生稳定性的差异的过程称为细胞分化
干细胞是一类具有分离和分化能力的细胞
全能性
受精卵能够分化出各种细胞、组织，形成一个完整的个体，所以把受精卵的分化潜能称为全能性
绝大多数植物细胞具有全能性
成熟动物细胞的核仍保留完整的基因组DNA
组织培养基本过程
组织培养就是取一部分植物组织，如叶、芽、茎、根、花瓣或花粉等，在无菌条件下接种在三角瓶中的琼脂培养基上，给予一定的温度和光照，使之产生愈伤组织，或进而生根发芽。
愈伤组织
在无菌条件下，将植物器官或组织（如芽、茎尖、根尖或花药）的一部分切下来，放在适当的人工培养基上进行培养，这些器官或组织就会进行细胞分裂，形成新的组织
愈伤组织是一种高度液泡化的无定形的薄壁细胞
脱分化
脱分化又称去分化。是指分化细胞失去特有的结构和功能变为具有未分化细胞特性的过程。
再分化
已经脱分化的细胞在一定条件下，有客经过愈伤组织，再分化出根和芽，形成胚状体或完整植株，这一过程叫作再分化
再分化形成的试管苗，移栽到地里，可以发育成完整的植物体。
二、影响植物组织培养的因素
MS培养基是目前使用最普遍的培养基。其具有较高的无机盐浓度，能够保证组织生长所需的矿质营养还能加速愈伤组织的生长。
大量元素
微量元素
有机物
关键性激素？
两种激素的使用顺序及比例
先使用生长激素？
先使用细胞分裂素？
同时使用？
愈伤组织是生根还是生芽均与细胞分裂素同生长素的适宜比例有关，有利于诱导根的分化时，细胞分裂素/生长素的比值（A）
A、低
B、相等
C、高
D、不确定
植物组织培养条件
含有全部营养成分的培养基、一定的温度、空气、无菌环境、适合的PH、适时光照等。
离体的植物器官、组织、细胞—→脱分化—→愈伤组织—→再分化—→根茎—→植物体
三、实验操作
制备MS固体培养基
1、配制各种母液
2、配置培养基（注意两点）
3、灭菌
MS培养基中各种营养物质的作用是什么？肉汤培养基相比，MS培养基有哪些特点？
外植体消毒：
旺盛嫩枝—→（流水）冲洗刷洗20分钟左右—→（无菌吸水纸）吸干表面水分—→（70%的酒精）摇动2~3次6-7秒—→（无菌水）清洗—→（无菌吸水纸）吸干表面水分—→（氯化汞）溶液浸泡1~2分钟—→（无菌水）清洗3次
接种、培养、移栽和栽培
1、前期准备？
2、接种操作
（接种过程中插入外植体时形态学上端朝上）
3、培养过程应该放在无菌箱中进行，并定期进行消毒，保持适宜的温度和光照。
4、移栽前应先打开培养瓶的封口膜，让其在培养间生长几日，然后用流水清洗根部培养基。
污染途径
1、外植体带菌
2、培养基及接种器具灭菌不彻底
3、接种操作时带入
4、环境不清洁
课堂总结、点评
菊花的组织培养—→基本原理—→细胞的全能性
              —→基本过程—→脱分化—→愈伤组织—→再分化
              —→影响因素—→材料性质、营养物质、调节物质、环境条件
              —→操作流程—→配置MS固体培养基—→外植体的消毒—→接种—→培养—→移栽—→栽培